Hypoxia-inducible factor HIF-1α modulates drugs resistance in colon cancer cells Academic Article

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  • Revista de la Facultad de Medicina

abstract

  • Introducción. Los mecanismos de resistencia a drogas podrían asociarsecon disminución en la muerte celular y su inducción podría depender de larespuesta al estrés oxidativo que origina la hipoxia. La correlación entrefactor inducible por hipoxia HIF-1α, cantidad de especies reactivas deoxígeno y su efecto sobre la supervivencia celular aún no ha sido evaluada.Objetivo. Evaluar el efecto de la inducción de la actividad de HIF-1αy la cantidad de especies reactivas de oxígeno sobre la apoptosis encélulas de cáncer de colon.Materiales y métodos. Células de cáncer de colon HT29 fuerontratadas con cloruro de cobalto (CoCl2) o doxorrubicina; la actividadde HIF-1α se evaluó por ELISA. Las especies reactivas de oxígenofueron determinadas con sonda fluorescente carboxi-H2DFFDA. Laapoptosis fue evaluada por la actividad de caspasa-3 y los niveles demRNA de los genes proapoptóticos PUMA y BAX por qRT-PCR. Elinhibidor de la endonucleasa APE-1 E3330 permitió evaluar el efectode las especies reactivas de oxígeno generadas por doxorubicina yCoCl2 sobre la apoptosis.Resultados. La hipoxia química combinada + doxorubicina es estresoroxidativo en células HT29 e induce una reducción en el procesoapoptótico de manera tiempo dependiente.Conclusión. La resistencia a la muerte celular mediada por hipoxia ydoxorubicina podría estar controlada por un mecanismo relacionadocon la actividad de HIF-1α y la cantidad de especies reactivas deoxígeno generadas.
  • Introduction: Drug resistance mechanisms may be associated with decreased cell death and its induction may depend on the response to oxidative stress caused by hypoxia. The correlation between hypoxia-inducible factor HIF-1α, the number of reactive oxygen species and their effect on cell survival has not yet been evaluated.Objective: The purpose of this study was to evaluate the effect of HIF-1α activity and reactive oxygen species (ROS) accumulation in apoptosis of colon cancer cells.Materials and methods: HT29 colon cancer cells were treated with CoCl2 or doxorubicin and the activity of HIF-1α was determined by ELISA assay. ROS were determined using fluorescence probe carboxy-H2DFFDA. Apoptosis was assessed by caspase-3 activation analysis, and PUMA and BAX mRNA levels by qRT-PCR. The reduction of the antiapoptotic effect due to hypoxia was attenuated by use of the endonuclease APE-1 (E3330) inhibitor. The endonuclease E3330 APE-1 inhibitor allowed evaluating the effect of ROS generated by doxorubicin and CoCl2 on apoptosis.Results: Chemical hypoxia in combination with doxorubicin is an oxidative stressor in HT29 cells and induces a reduction in the apoptotic process in a time-dependent manner.Conclusion: Resistance to hypoxia and doxorubicin-mediated cell death could be controlled by a mechanism related to the activity of HIF-1α and the amount of reactive oxygen species generated.

publication date

  • 2018-12-19

edition

  • 66

keywords

  • Activation Analysis
  • Apoptosis
  • Caspase 3
  • Cell Death
  • Cell Survival
  • Colonic Neoplasms
  • Doxorubicin
  • Drug Resistance
  • E 3330
  • Endonucleases
  • Enzyme-Linked Immunosorbent Assay
  • Fluorescence
  • HT29 Cells
  • Hypoxia
  • Hypoxia-Inducible Factor 1
  • Messenger RNA
  • Oxidative Stress
  • Polymerase Chain Reaction
  • Reactive Oxygen Species

International Standard Serial Number (ISSN)

  • 0120-0011

number of pages

  • 8

start page

  • 543

end page

  • 550