Identificación y validación funcional de la mutación c.2355+1G>A en MSH4 descubierta en una familia afectada por insuficiencia ovárica primaria: descripción de una nueva etiología molecular de la enfermedad Thesis

short description

  • Master's thesis

Thesis author

  • Carlosama Puerta, Carolina

abstract

  • Primary ovarian insufficiency (POI) is a frequent pathology that affects women under 40 years of age, characterized by an early cessation of menses and high FSH levels. Despite recent progresses in molecular diagnosis, the etiology of POI remains idiopathic in most cases. Whole-exome sequencing of members of a Colombian family affected by POI allowed us to identify a novel homozygous donor splice-site mutation in the meiotic gene MSH4 (MutS Homolog 4). The variant followed a strict mendelian segregation within the family and was absent in a cohort of 135 women over 50 years of age without history of infertility, from the same geographical region as the affected family. Exon trapping experiments showed that the splice-site mutation induced skipping of exon 17. At the protein level, the mutation p.Ile743_Lys785del is predicted to lead to the ablation of the highly conserved Walker B motif of the ATP binding domain, thus inactivating MSH4. Our study describes the first MSH4 mutation associated with POI and increases the number of meiotic/DNA repair genes formally incriminated as being responsible for this condition.
  • La insuficiencia ovárica primaria (IOP) es una enfermedad frecuente que afecta a mujeres por debajo de los 40 años de edad. Clínicamente, se caracteriza por la interrupción de la menstruación (amenorrea primaria o secundaria) y niveles elevados de FSH sérica (> 40UI/L). En cuanto a la etiología, se han descrito casos relacionados con anomalías genéticas en presentaciones sindrómicas y no sindrómicas de la enfermedad. Sin embargo, únicamente se han descrito algunas mutaciones en genes específicos como responsables del fenotipo. Esto puede deberse a que la reproducción femenina implica varias etapas, desde la diferenciación de los ovarios hasta la gametogénesis y la ovulación, cuyo daño puede tener un impacto en el desarrollo y bienestar de los ovocitos. Este escenario dificulta la selección de genes candidato relevantes para ser analizados por secuenciación de Sanger. Recientemente, estudios en casos familiares y aislados de IOP, a partir de la secuenciación de siguiente generación (NGS), han permitido la identificación de mutaciones en nuevos genes. En el presente trabajo de tesis se efectuó la secuenciación del exoma completo (WES) en miembros de una familia afectada por POI, lo que condujo a la identificación de una mutación homocigótica del sitio de splicing en el gen de meiosis MSH4. Se determinó que esta mutación es causal del fenotipo y por primera vez se asoció una versión mutante de MSH4 con el fenotipo de IOP.

keywords

  • Fertility
  • MSH4
  • Meiosis
  • Primary ovarian insufficiency

Document Id

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