Quantifying intracellular Mycobacterium tuberculosis: An essential issue for in vitro assays Academic Article

abstract

  • Many studies about intracellular microorganisms which are important regarding diseases affecting public health have been focused on the recognition of host–pathogen interactions, thereby ascertaining the mechanisms by which the pathogen invades a cell and makes it become its host. Such knowledge enables understanding the immunological response triggered by these interactions for obtaining useful information for developing vaccines and drugs. Quantitative cell infection assay protocols are indispensable regarding studies involving Mycobacterium tuberculosis, which takes the lives of more than 2 million people worldwide every year; however, sometimes these are limited by the pathogen's slow growth. Concerning such limitation, a detailed review is presented here regarding the different methods for quantifying and differentiating an intracellular pathogen, the importance of mycobacteria aggregate dissociation and multiplicity of infection (MOI) in infection assays. The methods’ differences, advantages, and disadvantages are discussed regarding intra and extracellular bacteria (on cell surface) differentiation, current problems are outlined, as are the solutions provided using fluorophores and projections made concerning quantitative infection assays.
  • Muchos estudios sobre microorganismos intracelulares que son importantes para las enfermedades que afectan a la salud pública se han centrado en el reconocimiento de las interacciones huésped-patógeno, determinando así los mecanismos por los que el patógeno invade una célula y la convierte en su huésped. Este conocimiento permite comprender la respuesta inmunológica desencadenada por estas interacciones para obtener información útil para el desarrollo de vacunas y medicamentos. Los protocolos de ensayo cuantitativo de infecciones celulares son indispensables en los estudios sobre Mycobacterium tuberculosis, que cada año se cobra la vida de más de 2 millones de personas en todo el mundo; sin embargo, a veces estos protocolos se ven limitados por el lento crecimiento del patógeno. Con respecto a dicha limitación, se presenta aquí una revisión detallada sobre los diferentes métodos para cuantificar y diferenciar un patógeno intracelular, la importancia de la disociación agregada de micobacterias y la multiplicidad de infecciones (MOI) en los ensayos de infección. Se discuten las diferencias, ventajas y desventajas de los métodos con respecto a la diferenciación de bacterias intracelulares y extracelulares (en la superficie de la célula), se describen los problemas actuales, así como las soluciones aportadas mediante el uso de fluoróforos y las proyecciones realizadas en relación con los ensayos cuantitativos de infección.

publication date

  • 2018/4/7

edition

  • 7

keywords

  • cell
  • infection
  • interactions
  • pathogen

International Standard Serial Number (ISSN)

  • 2045-8827