Resumen
- Galleria mellonella larvae have been widely used as alternative non-mammalian models for the study of fungal virulence and pathogenesis. The larvae can be acquired in small volumes from worm farms, pet stores, or other independent suppliers commonly found in the United States and parts of Europe. However, in countries with no or limited commercial availability, the process of shipping these larvae can cause them stress, resulting in decreased or altered immunity. Furthermore, the conditions used to rear these larvae including diet, humidity, temperature, and maintenance procedures vary among the suppliers. Variation in these factors can affect the response of G. mellonella larvae to infection, thereby decreasing the reproducibility of fungal virulence experiments. There is a critical need for standardized procedures and incubation conditions for rearing G. mellonella to produce quality, unstressed larvae with the least genetic variability. In order to standardize these procedures, cost-effective protocols for the propagation and maintenance of G. mellonella larvae using an artificial diet, which has been successfully used in our own laboratory, requiring minimal equipment and expertise, are herein described. Examples for the application of this model in fungal pathogenicity and gene knockout studies as feasible alternatives for traditionally used animal models are also provided.
- Las larvas de Galleria mellonella se han utilizado ampliamente como modelos alternativos no mamíferos para el estudio de la virulencia y patogénesis de los hongos. Las larvas se pueden adquirir en pequeñas cantidades en granjas de lombrices, tiendas de mascotas u otros proveedores independientes que se encuentran comúnmente en los Estados Unidos y partes de Europa. Sin embargo, en países con disponibilidad comercial nula o limitada, el proceso de envío de estas larvas puede causarles estrés, lo que resulta en una inmunidad disminuida o alterada. Además, las condiciones utilizadas para criar estas larvas, incluida la dieta, la humedad, la temperatura y los procedimientos de mantenimiento, varían entre los proveedores. La variación en estos factores puede afectar la respuesta de las larvas de G. mellonella a la infección, disminuyendo así la reproducibilidad de los experimentos de virulencia de los hongos. Existe una necesidad crítica de procedimientos estandarizados y condiciones de incubación para la cría de G. mellonella para producir larvas de calidad, sin estrés y con la menor variabilidad genética. Con el objetivo de estandarizar estos procedimientos, se describen aquí protocolos rentables para la propagación y el mantenimiento de larvas de G. mellonella utilizando una dieta artificial, que se ha utilizado con éxito en nuestro propio laboratorio y que requiere un equipo y una experiencia mínimos. También se proporcionan ejemplos de la aplicación de este modelo en estudios de patogenicidad fúngica y eliminación de genes como alternativas viables a los modelos animales utilizados tradicionalmente.