Resumen
- Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gattii cause cryptococcosis, a lifethreatening fungal infection affecting mostly immunocompromised patients. In fact, cryptococcal meningitis accounts for about 19% of AIDS-related deaths in the world. Because of long-term azole therapies to treat this mycosis, resistance to fluconazole leading to treatment failure and poor prognosis has long been reported for both fungal species. Among the mechanisms implicated in resistance to azoles, mutations in the ERG11 gene, encoding the azole target enzyme lanosterol 14-a-demethylase, have been described. This study aimed to establish the amino acid composition of ERG11 of Colombian clinical isolates of C. neoformans and C. gattii and to correlate any possible substitution with the in vitro susceptibility profile of the isolates to fluconazole, voriconazole, and itraconazole. Antifungal susceptibility testing results showed that C. gattii isolates are less susceptible to azoles than C. neoformans isolates, which could correlate with differences in the amino acid composition and structure of ERG11 of each species. In addition, in a C. gattii isolate with high MICs for fluconazole (64 mg/mL) and voriconazole (1 mg/mL), a G973T mutation resulting in the substitution R258L, located in substrate recognition site 3 of ERG11, was identified. This finding suggests the association of the newly reported substitution with the azole resistance phenotype in C. gattii. Further investigations are needed to determine the exact role that R258L plays in the decreased susceptibility to fluconazole and voriconazole, as well as to determine the participation of additional mechanisms of resistance to azole drugs.
- Cryptococcus neoformans y Cryptococcus gattii causan la criptococosis, una infección fúngica potencialmente mortal que afecta sobre todo a pacientes inmunodeprimidos. De hecho, la meningitis criptocócica es responsable de alrededor del 19% de las muertes relacionadas con el SIDA en el mundo. Debido a las terapias a largo plazo con azoles para tratar esta micosis, desde hace tiempo se ha informado de resistencias al fluconazol que conducen al fracaso del tratamiento y a un mal pronóstico para ambas especies fúngicas. Entre los mecanismos implicados en la resistencia a los azoles, se han descrito mutaciones en el gen ERG11, que codifica la enzima diana de los azoles lanosterol 14-a-demetilasa. Este estudio tuvo como objetivo establecer la composición aminoacídica del ERG11 de aislados clínicos colombianos de C. neoformans y C. gattii y correlacionar cualquier posible sustitución con el perfil de susceptibilidad in vitro de los aislados a fluconazol, voriconazol e itraconazol. Los resultados de las pruebas de susceptibilidad antifúngica mostraron que los aislados de C. gattii son menos susceptibles a los azoles que los aislados de C. neoformans, lo que podría correlacionarse con las diferencias en la composición de aminoácidos y la estructura del ERG11 de cada especie. Además, en un aislado de C. gattii con CMI elevadas para fluconazol (64 mg/mL) y voriconazol (1 mg/mL), se identificó una mutación G973T que da lugar a la sustitución R258L, localizada en el sitio de reconocimiento de sustrato 3 de ERG11. Este hallazgo sugiere la asociación de la nueva sustitución con el fenotipo de resistencia a los azoles en C. gattii. Se necesitan más investigaciones para determinar el papel exacto que desempeña R258L en la disminución de la susceptibilidad a fluconazol y voriconazol, así como para determinar la participación de mecanismos adicionales de resistencia a fármacos azólicos.